Различные вспомогательные репродуктивные технологии
В случае ЭКО (оплодотворение in vitro) сперматозоид самостоятельно проникает внутрь яйцеклетки.
Оплодотворение происходит в чашке Петри само по себе.
Различные вспомогательные репродуктивные технологии (ВРТ) направлены на оплодотворение яйцеклетки сперматозоидом, происходящее вне женского организма. Данные технологии используются в тех случаях, когда поддержка естественного зачатия не представляется возможной или когда eстественные методы терапии не приводят к успеху.
Яйцеклетки оплодотворяются сперматозоидами вне женского организма, a через несколько дней переносятся в полость матки в виде эмбрионов. Процесс должны завершиться прикреплением эмбриона к стенке матки, т. е. началом беременности.
Stadium Metaphase II
Проведению забора яйцеклеток предшествует гормональная стимуляция в течение примерно двух-трех недель, которая приводит к созреванию многих яйцеклеток. Момент их забора программируется. Подготовка спермы проводится с целью отбора только очень подвижных
сперматозоидов, которые затем вместе с яйцеклетками будут помещены в чашку Петри.
Отбор яйцеклеток выполняют с помощью тонкой аспирационной канюли через влагалище под ультразвуковым контролем. Как правило, процедура проводится при лёгкой анестезии. Оплодотворение яйца происходит в течение нескольких часов.
После чего начинается процесс деления яйцеклетки – то есть развитие эмбриона. Перенос эмбриона в полость матки обычно происходит через пять дней. Данная процедура совершенно безболезненна и выполняется с помощью тонкого катетера через влагалище и шейку матки.
Стимуляция / отбор яйцеклеток / подготовка сперматозоидов
oплодотворение / перенос эмбрионов / фаза жёлтого тела
Стимуляция
За некоторыми исключениями (когда яйцеклетки могут быть получены в спонтанном цикле) большинство процедур ЭКО проводятся с гормональной стимуляцией. Гормональнaя терапия приводит к созреванию более чем одной яйцеклетки в яичниках. При применении ультразвукового контроля момент отбора яйцеклетки (т.н. фолликулярная пункция) может быть специально спланирован.
-
Формы стимуляции
I. Среднедлинный протокол – «контролируемое подавление»
Через шесть дней после овуляции, во второй фазе цикла (т.е. при 28-дневном цикле на 20-й день) начинают подавление гормонов (ЛГ, ФСГ), синтезирующихся в гипофизе, – например, ежедневно применяя назальный спрей (Synarela®).
Применение спрея для носа вызывает десинситизацию гипофиза и тем самым предотвращает преждевременную овуляцию.
Гормональная стимуляция яичников при помощи ежедневных подкожных инъекций (Puregon®, Gonal F® или Menogon HP®) начинают на 4-й день следующего цикла – при этом продолжая применение назального спрея.
Стимуляция длится около десяти дней. В течение этого времени проводят три-четыре УЗИ и анализы крови.
Когда фолликулы достигают размера 20 мм, в 23:00 подкожно вводят гормон Pregnesin, после которого момент овуляции наступит через 36 часов. Сбор яйцеклеток проводят через день утром, между 9:00 и 11:00.II. Короткий протокол с антагонистами:
<EM/>Стимуляцию начинают на 3-й день цикла путём ежедневных подкожных инъекций. При этой форме стимуляции дополнительного использования назального спрея не требуется. На 7-й день цикла проводят первое ультразвуковое исследование. Когда фолликула достигает размера 14 мм, дополнительно к ежедневно вводимым стимуляционным гормонам делают инъекцию гормона cetrotide или orgalutran, за счёт чего предотвращают преждевременную овуляцию с целью её гормонального программирования. (Cetrotide® и оrgalutran® являются антагонистами ЛГ). Программирование проводится так же, как и при среднедлинном протоколе с контролированным подавлением.
Отбор яйцеклеток для ЭКО/ИКСИ
Яйцеклетки получают путем трансвагинальной фолликулярной пункции под ультразвуковым контролем: тонкую пробоотборную канюлю, прокалывая ткань влагалища, вводят в фолликулы, находящиеся в яичнике. Яйцеклетки осторожно отсасываются непосредственно из фолликулярной жидкости. Эта процедура повторяется для каждого фолликула и занимает в общей сложности около пяти-десяти минут.
-
Tехнология
Эякулят смешивают со специальной жидкостью (среда для культивирования клеток), после чего смесь подвергают центрифугированию, пока в осадке не окажутся сконцентрированными только клеточные компоненты эякулята. Жидкую фракцию удаляют, а на осадок наносят небольшое количество среды для культивирования клеток. Подвижные сперматозоиды активно всплывают из осадка в слой среды для культивирования клеток (т. н. флотация, swim up). Для оплодотворения одной яйцеклетки используют 100 000 сперматозоидов.
-
2. Оплодотворение.
В течение часа единственный сперматозоид внедряется в яйцеклетку. Начинается процесс оплодотворения.
Через 18 часов в яйцеклетке можно определить пронуклеус с женским или мужским набором хромосом. А это значит, что оплодотворение прошло успешно.3. Деление клеток
- Через 24 часа яйцеклетка превращается в двухклеточный эмбрион
- Через 48 часов в ней находится четырехклеточный эмбрион
- Через 72 часа – восьмиклеточный
- Примерно через 120 часов образуется бластоциста
-
Tехнология
Одна или две (редко три) эмбриональных клетки втягиваются в тонкий мягкий катетер, после чего через влагалище и шейку матки переносятся в её полость. Перенос эмбрионов выполняется в положении лёжа и является абсолютно безболезненной процедурой. После получасового отдыха процедура считается завершённой.
-
Поскольку начало беременности определяется уже на 11-й день после отбора яйцеклеток, то гормон беременности – хорионический гонадотропин – определяется на 11-й и 14-й день.
В случае успешного наступления беременности через 21 день после отбора яйцеклеток мы прoводим первое УЗИ-обследование. Размер плодного яйца в матке составляет около 5 мм.
Второе УЗИ проводится через 30 дней после отбора яйцеклеток. На этот раз уже заметен пятимиллиметровый эмбрион с сердечным ритмом.